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Cyro EM服务

Cyro EM服务

Cryo-EM可用于确定大分子复合物的结构,如起源识别复合物(ORC)。ORC识别并结合DNA,在细胞分裂之前开始复制细胞遗传物质的过程。(来源:李慧琳,布鲁克海文国家实验室,布鲁斯·斯蒂尔曼,冷泉港实验室)

所属分类:

结构生物学

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详细介绍

什么是冷冻电镜(Cryo-EM)?

冷冻电子显微镜(cryo-EM)是结构生物学领域内一项革命性的技术,其突破性的将含水生物样品极速冷冻并用电子束照射,利用三维重构的技术得到近原子分辨率级的蛋白结构。可绕过蛋白结晶过程,尤适用于难以结晶的膜蛋白(离子通道、GPCRs、转运蛋白)及大型蛋白复合物的结构研究。

冷冻电镜技术的应用与优势

科生景肽冷冻电镜服务的特色

科生景肽可提供一站式蛋白质结构生物学服务,客户仅需提供需要表达的基因序列或cDNA模板,我们可帮助从基因设计开始、优化基因、基因合成、分子克隆、再进行蛋白表达及可溶性测试、冷冻制样、数据收集、结构解析,到最后提交数据到PDB,并协助文论撰写。

 

  • 我们的低温电子显微镜平台有先进的显微镜,包括一台Titan Krios和一台Glacios。
  • 我们拥有一支在结构生物学、蛋白质科学和计算方面具有强大专业知识的专家团队。
  • 我们可以提供从基因合成到冷冻电镜结构的一站式蛋白质结构生物学服务。
  • 我们在具有挑战性的蛋白质制备方面有丰富的经验,如膜蛋白、离子通道蛋白、GPCRs,以及许多获得和稳定蛋白质复合物的先进技术。

服务流程

 

服务详情

 

灵活的分步收费方式,客户可根据负染或冷冻制样的数据情况,决定后续高分辨率数据采集和结构解析的服务项目。

 

服务项目 过程描述 周期 交付情况
蛋白制备 我们可以根据您的需求提供结构设计、基因合成、蛋白表达和蛋白纯化。 根据样品 纯化蛋白的质量控制数据,如SDS-PAGE,尺寸排除色谱。
负染初筛 负染制样和电镜检查,考察蛋白样品均一性。 1 周 提供代表性的负染颗粒照片(5~10张)。
负染收集少量数据和2D分类分析,进一步评估蛋白颗粒的状态。 2 周 提供负染2D图像分类、各分类颗粒的投影平均数的结果。
冷冻制样、初步数据采集 对冷冻制样条件进行优化;电镜收集少量数据,进一步评估蛋白颗粒质量,获得2D图像。 2-3 周 提供冷冻制样优化条件、2D图像分类情况、初步评估分辨率水平等方面的报告。
完整数据收集 完整数据收集 1-2 周 可提供原始数据包。
结构解析 数据处理和三维重构(不确定,视收集数据质量和解析难度)。 根据实际情况 搭建3D结构模型,提供近原子分辨率的蛋白3D电子密度图、3D结构。